Esta ficha reúne el material de trabajo de la fase 3 del taller de cultivo in vitro de orquídeas del laboratorio de siembras GadesPlant (VITROLAB): las ideas clave que se entregan al alumno, un ejercicio para repasar, el registro de lotes de medio de cultivo y los indicadores con los que medimos la fase.
El procedimiento completo, con materiales, paso a paso y lista de verificación, está en Medio de cultivo para orquídeas paso a paso: MS con agua de coco y P668 con plátano. Forma parte de la serie Cultivo in vitro de orquídeas paso a paso: fase 3 de 9.
Lo que vas a encontrar
- Las ideas clave de la fase, en frases cortas para el cuaderno.
- Ejercicio de cálculo, con su solución.
- La hoja de registro de la fase, con sus columnas.
- Los indicadores (KPI) de la fase: qué miden, fórmula y objetivo.
Ideas clave
- El medio sustituye al hongo de la naturaleza: le da a la semilla azúcar, sales y vitaminas.
- Medio A para sembrar (MS a media dosis + coco + carbón); medio B para repicar (P668 + plátano + coco).
- El P668 ya trae azúcar y carbón, pero no agar.
- El pH (5,7) se mide con todo disuelto y antes del agar.
- El agua de coco y el plátano varían de un lote a otro: por eso se anotan.
Ejercicio de cálculo
Vas a preparar 350 ml de medio A. ¿Cuánto MS con vitaminas, sacarosa, agua de coco, carbón activado y agar necesitas?
Ver la solución
MS 0,77 g · sacarosa 7 g · agua de coco 35 ml · carbón activado 0,7 g · agar 2,1 g.
Hoja de registro
Cada operación se anota en su hoja en el momento de hacerla. Las hojas de registro alimentan los indicadores y la trazabilidad en VITROLAB (lote de muestras → muestra → cultivo). Imprime la tabla o cópiala en tu cuaderno: una fila por operación.
REG-F3-01 · Registro de lotes de medio
| Código de lote del medio | Fecha | Fórmula (A/B) | Volumen (ml) | Lotes de productos (MS/P668, agar) | Origen del coco / plátano | pH inicial | pH final | Reactivo de ajuste | Frascos × ml | Operador |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Indicadores de la fase (KPI)
KPI F3-01 · Precisión del pH
| Qué mide | Lo cerca que queda el pH final del objetivo antes del agar. |
| Fórmula | | pH final − 5,7 | |
| Objetivo | ≤ 0,1 en cada lote |
| Si no cumple | Revisar la calibración del pHmetro y la técnica de ajuste. |
KPI F3-02 · Lotes de medio limpios
| Qué mide | La calidad conjunta de la preparación y la esterilización. |
| Fórmula | frascos contaminados en cuarentena ÷ frascos del lote × 100 |
| Objetivo | 0 % por lote; revisar el ciclo de olla si supera el 5 % |
| Si no cumple | Analizar el origen de la contaminación (Incubación y contaminación en frascos in vitro). |
Los objetivos son internos y provisionales: se revisarán cuando haya diez lotes registrados en cada fase.
Lista de verificación
La lista de verificación de esta fase se marca durante la operación, no al final, y cualquier «no» lleva anotada la acción tomada. La tienes completa en Medio de cultivo para orquídeas paso a paso.
Material del taller VITROLAB (DOC-VITROLAB-015 a 019), en estado «Borrador para validación» hasta la revisión de un especialista externo.
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