Fabricando medio de cultivo

Fabricando medio de cultivo: Ya tenemos la mezcla finalizada?, pues ahora llega el turno de la esterilización. Vamos con ello …

Medio de cultivo formula I – Parte 2 de 2

Esta es la parte de preparación del medio de cultivo que más tenemos que cuidar. De una buena esterilización depende que nuestro medio fracase o se conserve en condiciones óptimas. Asi podremos alojar en unos días las semillas de orquídeas que tenemos reservadas.

Una vez que la formula ha sido terminada, con la incorporación del agar culinario a la parte liquida, procedimiento que podéis ver en el video anterior, debemos distribuirlos en los tarros preparados.

Estos tarros previamente han sido lavados con agua y detergente e higienizados adecuadamente.

Vertido del medio

El medio se vierte sobre los tarros aún caliente, si lo dejamos enfriar se solidificará.

Si lo vamos a usar todo, con una buena cantidad de medio, lo habitual es rellenar al menos 25 ml / tarro.

Yo suelo poner algo más, unos 30ml, y en esta ocasión, para este proyecto, como me sobró, use 50 ml por tarro (25+25).

Tamaño del tarro

También dependerá del tamaño y ancho del tarro o envase usado, con que tenga un centímetro, centímetro y medio de base con medio es suficiente.

Si no se va a usar todo, podéis guardarlo en algún contenedor para el frigorífico y congelar sin esterilizar. Una vez que lo necesitemos, extraer una porción y esterilizar.

También podéis preparar más tarros y guardarlos en lugar fresco y seco, así se conservan durante algún tiempo.

Los que tengáis que esterilizar, colocad el medio dentro, dejar caer la tapa sin roscar, tapar con papel de aluminio, presionar alrededor del mismo y después a la olla, donde lo normal es que te quepan 7 u 8 frascos de los de conservas.

(Tened en cuenta el tamaño de los frascos para calcular el espacio de vuestra olla, en la primera siembra y repique, hasta no tener plántulas de nuestras orquideas que estén bien desarrolladas, podéis reducir el tamaño en altura de los mismos, y por consiguiente, entraran mas en la olla)

Esterilización

Poned a fuego medio hasta que alcance la presión máxima de vuestra olla. Comprobad las especificaciones de la misma, los tiempos y las presiones que soporta, leeros el manual de seguridad de la misma.

La olla a presión que uso, la pongo a fuego medio, 5 o 6 de potencia, y un poco antes de que alcance la presión máxima, la mantengo a fuego bajo, vigilando que no pierda la presión. Una vez alcance el máximo dejo cocinar durante 20 minutos.

Datos de la presión de la olla según indicadores.

Ya solo queda esperar. Dejar cocinar, dejad enfriar y aseguraros de que la olla a perdido toda la presión para poder abrirla.

Extracción de Frascos

Lo que suelo hacer es dejarla enfriar lentamente, durante toda la noche y la abro al día siguiente, así consigo evitar accidentes, que el medio no salte y manche las paredes y que los tarros se puedan cerrar fuertemente sin sufrir quemaduras.

Otra opción es esperar a que enfríe, dejad salir el vapor, abrir con cuidado y con la ayuda de algún guante o trapo cerrar los tarros fuertemente. Seguramente estarán calientes y después se irán enfriando poco a poco, lo que producirá vacío en su interior.

Esto es bueno, quedaran herméticos y sin posibilidad de que entre algo que no queremos y nos estropee el medio de cultivo: bacteria, hongos, levaduras, etc. pero tened en cuenta que si trabajáis con Glovebox para realizar el cultivo invitro, os resultara bastante difícil abrirlos en su interior, por la postura que debemos adoptar y porque estarán pegados, bien pegados.

Lo mejor, un término medio, cerrar calientes sí, pero no tan calientes.

Almacenaje

Ya solo os queda reservarlos en un lugar donde estén protegidos, una caja de almacenaje o un armario es una buena opción, observadlos durante unos días, 6 o 7 días es un buen periodo, y si todo va bien y no aparece contaminación, tendréis listo los tarros para proceder con la siguiente fase: cultivar.

Termino este artículo, y os dejo un video del proceso. Agradezco a todos los que me leéis vuestra visita a este sitio y os animo a comentar todo lo que creáis oportuno, si tenéis que preguntar algo que no se ha descrito en estas líneas, por favor preguntad, estaré encantado de ayudaros en lo que pueda.

Video

Para ver el video de la parte 1 de 2, sigue el enlace

Enlaces de Interés:

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