Esta ficha reúne el material de trabajo de la fase 4 del taller de cultivo in vitro de orquídeas del laboratorio de siembras GadesPlant (VITROLAB): las ideas clave que se entregan al alumno, un ejercicio para repasar, el registro de ciclos de esterilización, el de cuarentena y el indicador con el que medimos la fase.
El procedimiento completo, con materiales, paso a paso y lista de verificación, está en Cómo esterilizar el medio de cultivo en olla a presión y hacer la cuarentena. Forma parte de la serie Cultivo in vitro de orquídeas paso a paso: fase 4 de 9.
Lo que vas a encontrar
- Las ideas clave de la fase, en frases cortas para el cuaderno.
- Pregunta de repaso, con su solución.
- Las 2 hojas de registro de la fase, con sus columnas.
- El indicador (KPI) de la fase: qué mide, fórmula y objetivo.
Ideas clave
- La olla esteriliza por vapor a presión: en el nivel II (100 kPa) llega a unos 120 °C; en el nivel I (60 kPa), solo a unos 113 °C.
- Siempre nivel II, y el tiempo se cuenta desde que el vapor sale de forma continua.
- Cuanto más medio tenga el frasco, más tiempo necesita: con 25–50 ml, 35 minutos.
- La olla se deja enfriar sola; nunca se abre con presión.
- La cinta indicadora no prueba la esterilidad: solo que hubo calor.
- Una semana de cuarentena antes de sembrar evita perder semillas en frascos contaminados.
Pregunta de repaso
En una carga hay frascos de 25 ml de medio A y dos botellas de 250 ml de agua destilada. ¿Cuánto tiempo hay que mantener la olla en el nivel II?
Ver la solución
40 minutos, porque manda el recipiente de mayor volumen (250 ml).
Hojas de registro
Cada operación se anota en su hoja en el momento de hacerla. Las hojas de registro alimentan los indicadores y la trazabilidad en VITROLAB (lote de muestras → muestra → cultivo). Imprime la tabla o cópiala en tu cuaderno: una fila por operación.
REG-F4-01 · Registro de ciclos de esterilización
| Fecha | Ciclo n.º | Lotes de medio | N.º de frascos | Volumen mayor (ml) | Inicio de vapor continuo | Tiempo (min) | Indicadores (cinta / integrador / biológico) | Resultado | Operador |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
REG-F4-02 · Registro de cuarentena
| Lote de medio | Ciclo n.º | Frascos | Día 3 (contaminados) | Día 7 (contaminados) | Decisión | Observaciones | Operador |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
Indicador de la fase (KPI)
KPI F4-01 · Ciclos de olla conformes
| Qué mide | Si cada ciclo se hizo con el nivel, el tiempo y el indicador correctos. |
| Fórmula | ciclos conformes ÷ ciclos totales × 100 |
| Objetivo | 100 % |
| Si no cumple | No liberar la carga hasta revisar el ciclo. |
Los objetivos son internos y provisionales: se revisarán cuando haya diez lotes registrados en cada fase.
Lista de verificación
La lista de verificación de esta fase se marca durante la operación, no al final, y cualquier «no» lleva anotada la acción tomada. La tienes completa en Cómo esterilizar el medio de cultivo en olla a presión y hacer la cuarentena.
Material del taller VITROLAB (DOC-VITROLAB-021 a 024), en estado «Borrador para validación» hasta la revisión de un especialista externo.
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