Protocolos de Desinfección de Explantos

Orquídeas cultivo in vitro

Guía completa para la desinfección de material vegetal

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Versión 2.1 - Septiembre 2025

Cápsulas Verdes

Protocolo Recomendado
1
Etanol 70% 30-60 segundos
2
Hipoclorito de sodio 1% 10-15 minutos
3
Enjuague estéril 3-5 veces
Notas Importantes

Abrir únicamente en cabina de flujo laminar.

Flamear brevemente antes de abrir
No exceder tiempo de exposición al cloro

Hojas / Fragmentos Foliares

Protocolo Recomendado
1
Peróxido de hidrógeno (H₂O₂) 3% 5-10 minutos
2
Enjuague estéril 3-5 veces
Notas Importantes
CRÍTICO: No exceder tiempo (causa necrosis)

Recortar bordes dañados y usar solo tejido sano.

Opcional: ácido ascórbico 0.05-0.1% en último enjuague

Raíces / Pseudobulbos

Protocolo Recomendado
1
Hipoclorito 0.5% 5-8 minutos
Alt
Etanol 70% → Hipoclorito 0.5% 30s → 5min
Notas Importantes

Preparación: Lavar con detergente neutro y cepillado suave.

Usar SOLO secciones internas (descartar corteza)
Recomendado: microscopio estereoscópico

Meristemos Apicales

Protocolo Recomendado
1
Etanol 70% 30 segundos
2
Hipoclorito 0.5-1% 5-7 minutos
Notas Importantes
MATERIAL MUY DELICADO - No sobreexponer
Soluciones frescas (mismo día)
Ideal para plantas libres de virus

Guía Rápida y Consejos Prácticos

Lavado Inicial

Agua corriente 10-20 min. Para pseudobulbos/raíces: añadir detergente neutro.

Secuencia Recomendada

Etanol (breve) → Agente clorado/H₂O₂ → Enjuagues estériles (3-5x)

¿H₂O₂ o Cloro?

H₂O₂: más suave (hojas, semillas)
Cloro: más potente (material contaminado)

Antioxidantes

Ácido ascórbico (0.05-0.1%) en último enjuague reduce pardeamiento.

Flameado

Antes de abrir cápsulas reduce contaminación aérea. Usar con precaución.

Documentación

Fotografiar antes/después. Registrar fecha y lote de soluciones.

Advertencias de Seguridad

Equipo de protección: Usar guantes, mascarilla y protección ocular en todo momento.

Ventilación: Manipular soluciones