El peróxido de hidrógeno, (H2O2), también conocido como agua oxigenada, es un fuerte aliado en la desinfección de semillas y tejidos de Orquideas.
Su uso es alternativo a otros desinfectantes potentes como la lejía o el alcohol y puede usarse para trabajos de cultivo invitro, resultando efectiva para una desinfección segura.
Para nuestros ensayos y trabajos de cultivo invitro usamos agua oxigenada de 110 volúmenes, mucho mas concentrada y eficaz.
Prepararemos la solución al 30%. Esto es 70% de agua destilada pura esterilizada y el 30% de agua oxigenada 110 volúmenes.
- 70% agua destilada esterilizada (700 ml)
- 30% agua oxigenada de 110 volúmenes (300 ml)
Nos podemos preguntar: ¿Qué obtenemos de esta disolución?
Obtienes: Una disolución aproximadamente de 33 volúmenes de agua oxigenada (equivalente a ~10% de H₂O₂) lista para usar.
110 volúmenes × 0.30 = 33 volúmenes
Conversiones aproximadas:
- 3 volúmenes ≈ 1% H₂O₂
- 10 volúmenes ≈ 3% H₂O₂
- 20 volúmenes ≈ 6% H₂O₂
- 30 volúmenes ≈ 9% H₂O₂
- 110 volúmenes ≈ 30% H₂O₂
¿Qué es el agua oxigenada? peróxido de hidrógeno o agua oxigenada
El peróxido de hidrógeno (H₂O₂), comúnmente llamado agua oxigenada, es un compuesto químico oxidante fuerte. Es un líquido incoloro, ligeramente más viscoso que el agua, con propiedades desinfectantes, blanqueadoras y oxidantes.
Los volúmenes indican cuántos litros de oxígeno gaseoso (O₂) puede liberar 1 litro de solución de H₂O₂ a temperatura y presión estándar (0°C, 1 atm).
Pero eso no es todo, el agua oxigenada de H₂O₂ de 110 volúmenes tiene otras características y advertencias de seguridad y manipulación que debemos tener en cuenta y para su uso debemos tener las precauciones debidas y sobre todo usar equipos de proteccion personal.
Características del H₂O₂ de 110 volúmenes
- Concentración: ~30% H₂O₂
- Aspecto: Líquido incoloro
- Estabilidad: Se descompone lentamente liberando oxígeno
- pH: Ligeramente ácido (4-5)
- Densidad: ~1.1 g/cm³
Seguridad y Manipulación: peróxido de hidrógeno o agua oxigenada
⚠️ PELIGROS:
- Corrosivo: Puede causar quemaduras graves en piel y ojos
- Oxidante fuerte: Riesgo de incendio/explosión con materiales combustibles
- Irritante respiratorio: Los vapores pueden dañar vías respiratorias
- Inestable: Se descompone generando oxígeno y calor
EPIs Obligatorios:
- Gafas de seguridad con protección lateral
- Mascaras o pantallas de proteccion facial.
- Guantes de nitrilo o neopreno (NO latex)
- Bata de laboratorio resistente a químicos
- Mascarilla con filtro para vapores ácidos
- Calzado cerrado antideslizante
Manipulación Segura: peróxido de hidrógeno o agua oxigenada
- Trabajar en área ventilada o campana extractora
- Usar contenedores de plástico HDPE o vidrio borosilicato
- NO usar recipientes metálicos
- Agregar SIEMPRE el H₂O₂ al agua, nunca al revés
- Mantener alejado de calor, chispas y materiales combustibles
- Almacenar en lugar fresco, oscuro y ventilado
Usos como Desinfectante: peróxido de hidrógeno o agua oxigenada
El mecanismo de acción del peróxido de hidrógeno (H₂O₂), es el siguiente, de manera resumida:
El H₂O₂ actúa liberando oxígeno reactivo que destruye membranas celulares de microorganismos, oxida componentes celulares esenciales y desnaturaliza proteínas y ácidos nucleicos.
Es eficaz contra bacterias: muy efectivo (incluye esporas),virus: muy efectivo (incluye virus envueltos), hongos: Efectivo. Además su poder desinfectante y oxidante depende directamente del tiempo de exposición y de la concentración empleada. Estos factores son fundamentales para entender como funciona cuando sometemos el tejido o las semilla que manipulemos a esta inmersión.
Aplicaciones: peróxido de hidrógeno o agua oxigenada
Como desinfectante eficaz también puede ser usada para la desinfección de superficies no metálicas, esterilización de equipos, tratamiento de agua, y como sabemos para la desinfección de heridas (concentraciones bajas). Os dejo a continuación una tabla con una «Calculadora de Diluciones de Agua Oxigenada (H₂O₂)» para que podáis ver y experimentar distintas concentraciones:
🧪 Calculadora de Diluciones de Agua Oxigenada (H₂O₂)
El agua oxigenada de alta concentración es peligrosa. Use EPIs apropiados: gafas, guantes de nitrilo, bata, y trabaje en área ventilada. Siempre añada H₂O₂ al agua, nunca al revés.
Parámetros de Dilución
Funcionalidades de la tabla anterior:
- Cálculo automático de todas las diluciones posibles
- Tabla interactiva con diferentes concentraciones
- Exportación a Excel (.xlsx)
- Destacado especial para tu mezcla específica (~33 volúmenes)
- Advertencias de seguridad integradas
Recomendaciones adicionales: peróxido de hidrógeno o agua oxigenada
Para uso como desinfectante de superficies podéis emplear disoluciones mas bajas, por ejemplo: 20-30 volúmenes (6-9% H₂O₂), eficaz para limpieza de superficies contaminadas.
En cuanto a las condiciones de almacenamiento, siempre en un recipiente opaco, a temperatura ambiente, en envase etiquetado donde claramente se especifique concentración y fecha de caducidad.
Para manipulación en la cámara de flujo laminar para desinfección, uso alejado de fuentes de luz o tapados los porta semillas con papel de aluminio.
(El H₂O₂ se degrada con la luz de forma rápida, convirtiéndose en oxigeno y agua destilada).
Efectuar revisiones periódicas del suministro que tengáis almacenado, el H₂O₂ pierde potencia con el tiempo.
Protocolos de Desinfección con H₂O₂ por Géneros de Orquídeas
Consideraciones Adicionales por Género
Factores de Éxito Específicos:
Phalaenopsis:
- Histórica alta tasa de éxito en germinación sin hongos simbióticos cuando se suministran azúcares apropiados Post-excision drying of immature Phalaenopsis seeds improves germination and desiccation tolerance - ScienceDirect
- Muy tolerante a desinfectantes
- Germinación confiable en 2-3 semanas
Cattleya:
- Germina bien en presencia de fructosa, mejor que glucosa Post-excision drying of immature Phalaenopsis seeds improves germination and desiccation tolerance - ScienceDirect
- Sensible a sobre-desinfección
- Requiere medios con menor concentración de azúcar (20g/L vs 30g/L)
Oncidium:
- Germinación rápida y uniforme
- Beneficio de siembra densa
- Tolerante a variaciones en protocolo
Vanda:
- Mayor desafío técnico
- Requiere condiciones muy controladas
- Considerar medios especializados VW
Paphiopedilum:
- Extremadamente difícil
- Muchos profesionales prefieren división vegetativa
- pH más alto que orquídeas epífitas
Medios de Cultivo Recomendados:
- MS Modificado (general): Phalaenopsis, Oncidium
- MS + Extracto de plátano (enriquecido): Cattleya, Dendrobium
- MS con vernalización (estacional): Cymbidium
- VW (Vacin & Went) (especializado): Vanda
- P668 o terrestre (específico): Paphiopedilum
- P668+ zumo de coco: Cattleya (semillas maduras)
- P668+ Extracto de plátano: Cattleya, Dendrobium (Mantenimiento)
Señales de Problemas: peróxido de hidrógeno o agua oxigenada
En caso de que el cultivo no haya salido adelante es recomendable proceder a un estudio meticuloso para conocer la causa.
Se pueden dar muchas variantes, desde contaminaciones cuzadas por falta de higiene o esterilizacion, de instrumentos, por contacto son superficies, guantes mal higienizados, etc.
Como ejemplo, mencionamos algunos casos en los que los cultivos presentan signos evidentes de problemas, y que ayudan a conocer la causa: detectar semillas hinchadas excesivamente, lo que podría ser causa de exceso de oxigeno en el medio, acciones: reducir concentración H₂O₂.
Contaminación a las 24-48h: Aumentar tiempo o concentración de H₂O₂..
No germinación tras 8 semanas: Revisar viabilidad de semillas.
Germinación irregular: Verificar homogeneidad del lote
Enlaces de interés: peróxido de hidrógeno o agua oxigenada
Microsoft Word - HydrogenPeroxidebySueBottom.docx
How to Sterilize Your Explants
Explant Sterilization – Plant Tissue Culture Protocol
How to Grow Orchids From Seeds: Everything You Need to Know
Tutorial: How to Grow Orchids from Seed(Flasking Dry Seeds & Green Pods)
Disinfecting & Pre-treating Orchids
How to Disinfect Seeds Before Planting and Sprouting
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